A macchina completamente automatica di estrazione è rilevazione di l'acidu nucleicu di New Tech

Cinque forza:
● Strumenta cunfigurata cù l'estrazione di l'acidu nucleicu è u passu purificatu
● Strumenta cunfigurata cù u modulu d'estrazione ultrasonica
● Strumenta cunfigurata cù cumplettamente autumàticu
● Strumenta cunfigurata cù amplificazione di temperatura variabile
● Strumenta cunfigurata cù kit reagent cumplettamente chjusu

1. I reagenti di rilevazione di l'acidu nucleicu anu da esse estratti è purificati?
U principiu di a rilevazione di l'acidu nucleicu hè u seguitu: sottu l'azzione di primer, l'ADN polimerasi hè aduprata per realizà l'amplificazione di a reazione in catena nantu à DNA / RNA di u mudellu (chì richiede a trascrizione inversa di NA), è dopu a quantità di signale fluorescente liberata hè rilevata per determinà. se a mostra cuntene l'acidu nucleicu (DNA / RNA) di u patogenu per esse rilevatu.

1) I campioni chì ùn sò micca stati estratti o purificati ponu cuntene assai cumpunenti chì affettanu u risultatu finali: nucleasi (chì ponu dissolve l'acidu nucleicu di destinazione è causanu falsi negativi), proteasi (chì ponu riduce l'ADN polimerasi è causanu falsi negativi), metalli pesanti. sali (chì porta à l'inattivazione di sintasi è provoca falsi pusitivi), PH troppu acidicu o troppu alkaline (chì pò causà a reazione di fallimentu), RNA incompletu (chì porta à fallimentu di trascrizzione inversa falsa negativa).

2) Certi campioni sò difficiuli di amplificà direttamente: Gram-pusitivi è certi parassiti, per via di e so pareti cellulari spessi è altre strutture, se ùn passanu micca per u prucessu di estrazione di l'acidu nucleicu è di purificazione, u kit senza estrazione pò falla per tali. campioni.

Dunque, hè cunsigliatu di selezziunà u kit di prova o strumentu cunfiguratu cù u passu di estrazione di l'acidu nucleicu.

2. Estrazione chimica o estrazione di fragmentazione ultrasonica fisica?
In generale, l'estrazione chimica pò esse applicata à a maiò parte di u pretrattamentu è a purificazione.In ogni casu, in i batteri Gram-positivi di pareti spessi è in certi parassiti, hè ancu u casu chì l'estrazione chimica ùn pò micca ottene mudelli efficaci di l'acidu nucleicu, risultatu in falsi negativi.Inoltre, l'estrazione chimica spessu usa l'agenti forti, se l'eluzione ùn hè micca cumpletu, hè faciule d'introduce alkali forte in u sistema di reazzione, risultatu in risultati imprecisi.

A frammentazione ultrasonica usa a triturazione fisica, chì hè stata aduprata cù successu da GeneXpert, una impresa di punta in u campu di POCT per l'usu umanu, è hà un vantaghju assolutu in l'estrazione di l'acidu nucleicu di certi campioni cumplessi (cum'è Mycobacterium tuberculosis).

Dunque, hè cunsigliatu di selezziunà un kit di teste o un strumentu cunfiguratu cù un passu di estrazione di l'acidu nucleicu.è hè ottimale s'ellu ci hè un modulu d'estrazione ultrasonica.

3. Manuale, semi-automaticu è cumplettamente autumàticu?
Questu hè un prublema di u costu di u travagliu è l'efficienza di u travagliu.Attualmente, l'ospedali di animali domestici senza abbastanza staffi, è l'estrazione è a rilevazione di l'acidu nucleicu hè un travagliu chì richiede certe cumpetenze è sperienza.Ùn ci hè dubbitu chì l'estrazione di l'acidu nucleicu completamente automaticu è a macchina di rilevazione hè a scelta perfetta.

4. Amplification di temperatura constante o amplification di temperatura variabile?
A reazione di amplificazione hè un ligame di rilevazione di l'acidu nucleicu, è a tecnulugia prufessiunale implicata in questu ligame hè cumplessa.À pocu pressu, l'enzimi sò usati per amplificà l'acidu nucleicu.In u prucessu di amplificazione, u signale di fluorescenza amplificata o u signale di fluorescenza incrustatu hè rilevatu.In generale, più prima appare u signale di fluorescenza, più grande hè u cuntenutu di u genu di destinazione di a mostra.

L'amplificazione di temperatura constante hè una amplificazione di l'acidu nucleicu à una temperatura fissa, mentre chì l'amplificazione di temperatura variabile hè una amplificazione ciclica strettamente secondu a denaturazione-annealing-estensione.U tempu d'amplificazione di a temperatura constante hè statu realizatu, mentre chì u tempu d'amplificazione di a temperatura variabile hè assai affettatu da a rata di l'aumentu è a caduta di a temperatura di l'instrumentu (attualmente, parechji pruduttori sò stati capaci di fà 40 cicli d'amplificazione in circa 30 minuti).

Se e cundizioni di u laboratoriu sò boni è a zonificazione hè stretta, hè ragiunate dì chì a diffarenza di precisione trà i dui ùn serà micca grande.Tuttavia, l'amplificazione di a temperatura variabile sintetizà più prudutti di l'acidu nucleicu in un tempu relativamente più breve.Per i laboratorii senza zoning strettu è persunale di furmazione prufessiunale, u risicu di perdita di l'aerosol di l'acidu nucleicu serà più grande, u falsu pusitivu si verifica una volta chì a fuga accade, è chì hè estremamente difficiuli di eliminà.

Inoltre, l'amplificazione di a temperatura constante hè ancu più propensa à l'amplificazione non specifica quandu a mostra hè cumplessa (a temperatura di reazione relativa hè più bassa, è più alta hè a temperatura di l'estensione, migliore hè a specificità di u ligame di l'amori).

In quantu à a tecnulugia attuale, l'amplificazione di a temperatura variabile hè più affidabile.

5. Cumu evità u risicu di perdite di i prudutti di l'amplificazione di l'acidu nucleicu?
Attualmente, parechji pruduttori sceglienu u tubu PCR di tippu di glandula cum'è u tubu di reazzione di l'acidu nucleicu, chì hè sigillatu da a frizione, è a denaturazione di temperatura in a temperatura variabile di denaturazione in a temperatura variabile di amplificazione PCR righjunghji 90 gradi.
centigradu.U prucessu ripetutu di espansione cù u calore è a cuntrazione cù u friddu hè una grande sfida à u sigilamentu di u tubu PCR, è u tubu PCR di u tipu di glandula hè relativamente faciule per causà fuga.

Hè preferibile aduttà a reazione cù un kit / tubu completamente sigillatu per evità a fuga di u pruduttu di reazione.Saria perfettu s'ellu puderia esse un kit cumplettamente sigillatu per l'estrazione è a rilevazione di l'acidu nucleicu.

Allora a nova macchina di estrazione è rilevazione di l'acidu nucleicu completamente automatica di New Tech hà e cinque scelte ottimali sopra.